病毒載體構建穩(wěn)定細胞株有什么優(yōu)勢？化學試劑介導的轉(zhuǎn)染方法和電轉(zhuǎn)，整合率低，同時整合位點不穩(wěn)定，易發(fā)生再次丟失的情況，而且整合位點一般都在轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)之外，所以并不是理想的穩(wěn)定整合工具。另外，整合后的拷貝數(shù)是由核內(nèi)的外源DNA局部濃度，而不是轉(zhuǎn)染時的DNA的量決定，而化學方法在輸入質(zhì)粒載體入核的效率比電轉(zhuǎn)和病毒載體相比要低得多，導致其轉(zhuǎn)染相同細胞所用質(zhì)粒載體用量要大大高于其它方法，造成入核質(zhì)粒載體量難以控制，這也解釋了為什么化學轉(zhuǎn)染方法和其它兩種方比，更傾向于得到串聯(lián)多拷貝。以上...

ATCC細胞復蘇和培養(yǎng)*手冊細胞是我們很多基礎研究的基礎，那么細胞能否被成功復蘇就尤為重要了。美國菌種保藏中心，又稱美國模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標準品、菌株達兩萬多種。以下是來自ATCC的*說明，小凳子搬起來。01收到細胞的注意事項凍存的ATCC細胞株和雜交瘤細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細胞后，可以立即解凍復蘇，去除二甲基亞砜（DMSO）后進行細胞培養(yǎng)。如果不立即復蘇培養(yǎng)細胞...

白血病細胞株來告訴你白血病的病因一、輻射損傷電離輻射致白血病作用已在動物實驗中得到證實，而對人類的致白血病作用也從以下的事實得到提示：早期不加防護的放射線工作者，其白血病發(fā)病率比一般醫(yī)生高8－9倍；強直性脊柱炎的患者采用放射性治療者，白血病發(fā)病率比一般人高10倍，日本的廣島和長畸原子彈爆炸后，遭受輻射地區(qū)與末遭輻射地區(qū)的居民之間的白血病發(fā)病率相差30倍。二、化學因素已知很多化學物質(zhì)有致白血病作用，如工業(yè)中廣泛應用的苯。藥物中的抗癌劑（尤以烷化劑）、乙雙嗎啉、氯霉素、保泰松、安...

我國在腫瘤光動力治療方面有重大進展耐藥是導致腫瘤患者化療失敗的主要原因，是攻克癌癥的一項重大挑戰(zhàn)。光動力治療（photodynamictherapy，PDT）可以利用光激發(fā)卟啉等光敏劑產(chǎn)生活性氧殺死腫瘤細胞，創(chuàng)傷小、毒性小、恢復快、可保護容貌，并且可利用光動力熒光診斷檢測早期癌或癌前病變，具有無創(chuàng)、快速、客觀等特點。但是，單一的光動力治療后，腫瘤容易復發(fā)。在國家重點研發(fā)計劃納米科技重點專項項目“基于納米分子影像探針的癌癥微創(chuàng)介入診療導航技術”的支持下，北京大學工學院戴志飛教授...

微生物菌種保存方法之載體保存法即將微生物吸附在適當載體上進行干燥保存的方法。常用的有方法包括以下幾種，如：①土壤保存法：主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液，立即在室溫下進行干燥或使菌體繁殖后再干燥，然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜，土壤需風干、粉碎、過篩和滅菌。使微生物在土壤中繁殖后進行干燥保存的方法是：取適量土壤(5克)，置于塞有棉塞的試管中，加水或加入充分稀釋的液體培養(yǎng)基(以含水量為土壤大持水量的60%為...

細胞復蘇凍存注意事項凍存和復蘇的原則：慢凍快融當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序1.標準程序：采用細胞凍存器當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2....

菌種保存有哪些注意事項從事菌種工作方面的朋友們一定知道，關于菌種的保藏是一件十分復雜的事情。那么究竟如何獲得的菌種保存效果呢?主要注意的有三個方面。*就是菌種在保存之前的狀態(tài)。絕大多數(shù)的菌種，保存的都應該十它的休眠體，比如說孢子或者是芽孢。而且用來保存的孢子或者是芽孢，應該采用的是新鮮的斜面上生長的非常豐滿的培養(yǎng)物。而菌種培養(yǎng)的時間和溫度都會影響到菌種的保存質(zhì)量。如果說培養(yǎng)時間太短，那么保存的時候就容易死亡。而培養(yǎng)的時間如果太長，又容易使菌種的生產(chǎn)性能發(fā)生衰退。一般來說，溫度...

人前列腺癌細胞；LNCaP特征特性該細胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長，所以傳代的時候要反復吹打形成單個細胞；該細胞貼壁不牢，達不到匯合狀態(tài)，而且會使培養(yǎng)基迅速變酸；傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時挪動培養(yǎng)瓶，會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況，需要重新孵育24...